核酸提取的好壞直接影響檢測結果的有效性

核酸是由許多核酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質(zhì)之一。核酸是分子生物學(xué)的基礎，而核酸提取是核酸檢測，乃至于整個(gè)分子行業(yè)繞不過(guò)去的門(mén)檻，很多時(shí)候一份樣本的核酸提取的好壞直接決定了檢測結果的有效性。

常見(jiàn)核酸提取純化方法：

1、苯酚氯仿抽提法
苯酚作為蛋白變性劑，同時(shí)抑制了DNase的降解作用，用苯酚處理勻漿液時(shí)，由于蛋白與DNA聯(lián)結鍵已斷，蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。離心分層后取出水層，多次重復操作，再合并含DNA的水相，利用核酸不溶于醇的性質(zhì)，用 乙醇沉淀DNA。此時(shí)DNA是十分粘稠的物質(zhì)，可用玻璃慢慢繞成一團，取出。此法的特點(diǎn)是使提取的DNA保持天然狀態(tài)。

2、水抽提法

利用核酸溶解于水的性質(zhì)，將組織細胞破碎后，用低鹽溶液除去RNA, 然后將沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中，離心后收集上清液，在上清中加入固體氯化鈉調節至2. 6M. 加入2倍體積95%醇，立即用攪拌法攪出，然后分別用66% , 80%和95%乙醇以及丙銅洗滌，最后在空氣中干燥，即得DNA樣品，此法提取的DNA中蛋白質(zhì)含量較高，故一般不用，為除蛋白可將此法加以改良，在提取過(guò)程中加入SDS。

3、離心柱純化

此種方法是利用核酸表面會(huì )覆蓋一層由水分子構成的薄膜，在高鹽環(huán)境下，這層親水膜會(huì )遭到破壞從而核酸可被吸附在離心柱上，而其他雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物等則會(huì )被離心沉淀與核酸分離。最后通過(guò)洗脫，將核酸從吸附膜上脫離，即可得到純化后的核酸。離心柱純化也是的試劑盒提取中廣泛的使用方法。

4、磁珠法

一般用于自動(dòng)化提取，生物磁珠是一種新型的功能化固體載體，其表面包被有活性基團，可以與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián)，兼具有液體的流動(dòng)性和固體磁性材料等特點(diǎn)，在外磁場(chǎng)的作用下可以定向移動(dòng)和栠中，當撤去外磁場(chǎng)后，稍加振蕩或抽吸又可均勻分散于液體中，從而使固液相的分離變的十分快捷方便，通過(guò)簡(jiǎn)單的洗脫可以得到純度很高的靶向物質(zhì)。